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Addgene教您(nin)如何保(bao)存和使(shi)用質粒?

常見問題&FAQ

Addgene是如何制(zhi)備(bei)穿刺菌的(de)?

收到Addgene質粒後,您(nin)應該怎(zen)麼處理?

Addgene推薦的(de)細菌保(bao)存方法(fa)?

下面這個視頻(pin)中就這些問題做(zuo)了詳細的(de)說明(ming)。如果(guo)感興趣(qu),趕(gan)快點擊視頻(pin)學習吧!別忘(wang)記了把好東西分享哦!

 

 

穿刺菌的(de)制(zhi)備(bei)

 

Addgene質粒以穿刺菌的(de)形式(shi)運輸。Addgene的(de)技術(shu)人員會在裝有甘油菌的(de)小(xiao)管上打上二維的(de)條形碼(ma),每個穿刺菌對應一個單(dan)獨條形碼(ma),以保(bao)證質粒被正確運輸。

Addgene技術(shu)人員用無菌牙簽取一些庫存細菌,然後接種(zhong)形成(cheng)穿刺菌。穿刺接種(zhong)的(de)細菌在溫箱中孵育過夜(每個質粒的(de)生長溫度信息可以在Addgene官網上查詢),並在第(di)二天上午檢查其是否(fu)生長,技術(shu)員應該在制(zhi)備(bei)的(de)穿刺菌表面上能看到細菌。條形碼(ma)在包裝時要再次(ci)掃(sao)描以確保(bao)科學家收到正確fan)鬧柿Qpin)。

 

質粒培養方法(fa)

您(nin)收到穿刺菌後,應該在4攝氏度冰箱中存放您(nin)的(de)質粒樣品(pin)。並在兩周(zhou)內,在含有相應抗生素(每個質粒的(de)抗生素信息可以在Addgene官網上查詢)的(de)瓊(qiong)脂平(ping)板上劃線培養出(chu)單(dan)菌落。然後從一個單(dan)菌落中挑(tao)取細菌,接種(zhong)到液(ye)體培養基中,依據Addgene網站(zhan)上質粒的(de)生長條件進行過夜培養。

 

保(bao)存細菌時bao) 枰﹦00 ul細菌的(de)液(ye)體培養物和300 ul 50%的(de)甘油按照(zhao)1:1比例(li)混(hun)合制(zhi)成(cheng)甘油菌,儲存在-80攝氏度冰箱中xiao)8視途 J淺?詿媧 柿5de)一個好方法(fa)。此外(wai),您(nin)可以使(shi)用細菌培養物提取質粒以備(bei)以後使(shi)用或存放。

 

更多信息,可以訪問Addgene網站(zhan)上的(de)相關內容。

 

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